聚合物基質(zhì)液相色譜柱裝柱的操作要點(diǎn):裝柱前柱底要墊一層脫脂棉以防吸附劑外漏。
聚合物基質(zhì)液相色譜柱裝柱有干法裝柱和濕法裝柱兩種方法:
(1)干法裝柱:將硅膠通過漏斗裝入柱內(nèi),中間不應(yīng)間斷,形成一細(xì)流慢慢加入管內(nèi)。也可用橡皮槌輕輕敲打柱硅膠柱使硅膠裝填連續(xù)均勻、緊密。柱裝好后,打開下端活塞,然后倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內(nèi)空氣,并保持一定液面。
(2)濕法裝柱:將起初準(zhǔn)備使用的洗脫劑裝入柱內(nèi),打開下端活塞,使洗脫劑緩慢流出。然后把硅膠慢慢連續(xù)不斷地倒入柱內(nèi)(或?qū)⒐枘z與適量洗脫劑調(diào)成混懸液慢慢加入柱內(nèi),),硅膠依靠重力和洗脫劑的帶動,在柱內(nèi)自由沉降,此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內(nèi)保持一定的液面,直至把硅膠加完并在柱內(nèi)沉降不再變動為止。然后在硅膠上面加一小片濾紙或少許脫脂棉。根據(jù)加樣量控制洗脫劑液面至一定高度。
勻漿法:攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分?jǐn)嚢琛H绻疵搫┦鞘兔?乙酸乙酯/丙酮體系,就用石油醚拌;如果洗脫劑是氯仿/醇體系,就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿,說明溶劑中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不與水配伍走分配色譜的話,必須預(yù)先用無水硫酸鈉久置干燥。氯仿用無水氯化鈣干燥,以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感,不能用氯仿體系過柱。